一、基本要求 
掌握：本章要求掌握分光光度法的特點(diǎn)、基本原理、測定方法及計算方法；分子吸收光譜與電子躍遷類型，物質(zhì)對光的選擇吸收與吸收光譜曲線，摩爾吸收系數(shù)與吸收系數(shù)，吸光度與透光度，偏離朗伯-比爾定律的原因；掌握顯色反應(yīng)條件及光度測量條件的選擇；掌握紫外—可見分光光度計的主要部件，各部件的作用及儀器原理，主要類型及特點(diǎn)；掌握差示分光光度法的原理、特點(diǎn)。
理解：物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與紫外吸收光譜的關(guān)系，吸收波長位移與分子結(jié)構(gòu)變化的關(guān)系；紫外—可見分光光度定量分析影響結(jié)果準(zhǔn)確度的各種因素。 
了解：了解紫外—可見分光光度法測定靈敏度和選擇性的途徑；雙波長分光光度法等其它分光光度法定量測定的方法；紫外—可見分光光度法在有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)解析方面的作用及在其他方面的應(yīng)用。 
二、 基本概念與重點(diǎn)內(nèi)容 
A概述 
1．紫外—可見分光光度法的特點(diǎn) 
靈敏度與準(zhǔn)確度較高；選擇性較好；設(shè)備簡單、操作簡便。 
2．分光光度法的發(fā)展過程 
目視比色法 光電比色法 分光光度法 
3． 分子的紫外—可見吸收光譜 
分子的紫外—可見吸收光譜是基于物質(zhì)分子吸收紫外輻射或可見光，其外層電子躍遷而成，又稱分子的電子躍遷光譜。紫外—可見分光光度法是基于物質(zhì)分子的紫外—可見吸收光譜而建立的一種定性、定量分析方法。 
4． 光的基本性質(zhì) 
5．物質(zhì)對光的吸收及吸收光譜 
6．紫外—可見吸收光譜與電子躍遷類型 
7．生色團(tuán)與助色團(tuán) 
B 光的吸收定律 
1．光吸收的基本定律（朗伯-比爾定律） 
2．吸光度與透光率、百分透光率之間的關(guān)系 
3．工作曲線的繪制與應(yīng)用 
4．吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)和桑德爾靈敏度 
5． 偏離朗伯-比爾定律的因素 
C紫外-可見分光光度計 
1． 分光光度計的主要部件 
2． 在紫外和可見光區(qū)進(jìn)行測量時，分別選擇何種光源 
3． 單色器的主要元件 
光柵；棱鏡 
4． 分光光度計中的檢測器類型 
早期：光電池；光電管；光電倍增管。 
5．紫外-可見分光光度計的類型及特點(diǎn) 
D顯色測定試樣的制備和光度測定條件的選擇 
、 
1．顯色反應(yīng)及其影響因素 
2．測定讀數(shù)誤差和測定條件的選擇 
5．入射波長的選擇 
E 分光光度定量測定方法與其他應(yīng)用 
1．單組分的測定 
通常采用 A-C 標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測定。 
2.多組分的同時測定 
3．紫外可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)解析中的作用 
了解共軛程度、空間效應(yīng)、氫鍵等；可對飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進(jìn)行判別。在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)解析中，紫外可見吸收光譜沒有紅外吸收光譜提供的結(jié)構(gòu)信息多。 
4．紫外—可見吸收光譜中有機(jī)物發(fā)色體系信息分析的一般規(guī)律